Нейтральный красный ЧДА
Нейтральный красный ЧДА – органический катионный краситель, применяемый в аналитической химии, микробиологии и клеточной биологии в качестве кислотно-основного индикатора и витального красителя. Реактив в квалификации ЧДА предназначен для лабораторных и исследовательских работ, где требуется контролируемая чистота и воспроизводимость физико-химических характеристик.
Химическая идентификация
- Формула: C₁₅H₁₆N₄·HCl
- Молекулярная масса: 288,78 г/моль
- Химический класс: азиновые (феназиновые) красители
- Ионная форма: катион феназиния (в виде гидрохлорида)
Нормируемые физико-химические показатели
- Внешний вид: кристаллический порошок от черного до черно-зеленого цвета.
- Температура плавления: 181–183,5 °C.
- Интервал перехода окраски (pH): 6,8–8,0 (красная → жёлтая).
- Остаток после прокаливания (в пересчёте на сульфаты): не более 1,0%.
Указанные параметры являются базой для идентификации и подтверждения качества реактива в аналитической практике.
Физические свойства
Нейтральный красный ЧДА относится к катионным азинным красителям феназинового ряда. Характеризуется развитой π-сопряжённой системой, обеспечивающей интенсивное поглощение в видимой области спектра. Оптические свойства обусловлены наличием донорно-акцепторных аминогрупп, участвующих в протолитических равновесиях.
- Растворимость в воде: хорошо растворим – до 50 г/л при температуре 25 °C.
- Растворимость в этаноле: около 1.8% (достаточно для приготовления спиртовых растворов).
- Растворимость в органических растворителях: в ксилоле и других неполярных жидкостях практически нерастворим.
- Спектральные характеристики: максимум поглощения в этаноле находится в интервале 539–544 нм. В водных буферных растворах: при pH 6.8 – 514–519 нм, при pH 8.0 – 453–456 нм.
- Удельная абсорбция (A¹% 1см): 1130–1520 (в пересчете на сухое вещество).
- Потери при высушивании: не более 8%, фактическое значение обычно около 5.2%, что соответствует содержанию влаги.
- Устойчивость: стабильная в твердом состоянии, в растворах чувствителен к свету и длительному хранению.
Параметры важны для воспроизводимости аналитических, микробиологических и цитологических исследованиях.
Индикаторные свойства
Нейтральный красный ЧДА является кислотно-основным индикатором слабощелочной области:
- в кислой и нейтральной среде – красная окраска (протонированная форма);
- в щелочной среде – желтая окраска (депротонированная форма).
Механизм основан на изменении электронной структуры молекулы при протонировании аминогрупп, что приводит к батохромному/гипсохромному сдвигу полосы поглощения.
Биологические свойства
Краситель обладает выраженной лизосомотропностью и используется как витальный краситель:
- проникает в живые клетки;
- селективно накапливается в кислых внутриклеточных компартментах (лизосомах);
- применяется в тестах жизнеспособности клеток.
Сферы применения
ЧДА используется в областях, где требуется высокая точность и чистота реактива. Благодаря отсутствию посторонних примесей, он дает стабильные и воспроизводимые результаты.
В аналитической химии
- Как двухцветный кислотно-основный индикатор для титрования.
- Служит компонентом для приготовления смешанных индикаторов для резких и контрастных переходов окраски.
- Для определения ионов металлов.
В микробиологии, гистологии и цитологии, токсикологии и фармакологии
- Для прижизненного (витального) окрашивания микроорганизмов и клеток.
- Входит в состав диагностических питательных сред, например, в агар МакКонки.
- Для тестов на цитотоксичность (Neutral Red Uptake Assay).
- Для окрашивания дрожжевых клеток и грибов.
- Для суправитального окрашивания клеток крови и тканей.
- Для выявления лизосом и фагосом в клетках.
- В качестве контрастирующего красителя при флуоресцентной микроскопии.
- В тестах на поглощение нейтрального красного для оценки цитотоксичности лекарственных препаратов.
- Используется для определения загрязнения окружающей среды.
- Служит маркером при изучении проницаемости клеточных мембран.
В производстве используется при изготовлении готовых индикаторных бумаг и растворов для лабораторий. Применяется как эталонное вещество при калибровке спектрофотометров. Входит в состав контрольных образцов для проверки качества питательных сред.
Условия хранения
- Защита от света. Разлагается на свету, окисляется, меняет цвет. Хранить в таре из оранжевого стекла или светонепроницаемых контейнерах.
- Температурный режим. Диапазон от +2 до +30 °C. Не размещать вблизи отопительных приборов. Избегать резких перепадов температуры.
- Защита от влаги. Реактив гигроскопичен. Нормируемые потери при высушивании не более 8%.
- Герметичность упаковки. Хранить в плотно закрытой заводской упаковке. Отбор проводить быстро чистым сухим шпателем, сразу закрывать емкость. Сохранять заводскую этикетку.
- Срок годности. До 60 месяцев (5 лет) при соблюдении условий. После истечения срока к использованию не допускается без повторной проверки.
- Требования к помещению. Сухое помещение с вентиляцией. Влажность не более 60–70%. Доступ ограничен и контролируется.
Работа с веществом требует соблюдения стандартных мер лабораторной безопасности (СИЗ, вытяжной шкаф, предотвращение пылеобразования).
| Внешний вид | Кристаллический порошок от чёрного до чёрно-зелёного цвета |
| Интервал pH перехода окраски от красной к желтой | 6,8-8,0 |
| Температура плавления, °C | 181-183,5 |
| Остаток после прокаливания (в виде сульфатов), %, не более | 1,0 |